Onder de microscoop · Fluorescentie

Wat u ziet met een fluorescentiemicroscoop

Een laag endotheelcellen gekleurd met drie fluorescerende kleurstoffen, zoals het commerciële preparaat FluoCells nr. 1: DAPI in de kernen, falloïdine met Alexa Fluor 488 in de actine en MitoTracker Red CMXRos in de mitochondriën. Elke kleurstof absorbeert één kleur licht en zendt een andere uit, met een grotere golflengte.

Wissel in het paneel van filter: uv, blauw of groen.

100×: de cellaag

De endotheelcellen vormen een laag platte cellen, naast elkaar, als een plaveisel. Met het blauwe filter ziet u hun actineskelet.

400×: één filter, één kleurstof

Onder uv-licht van 365 nm lichten de kernen blauw op (DAPI). Onder blauw licht van 485 nm licht de actine groen op (falloïdine). Onder groen licht van 525 nm lichten de mitochondriën rood op (MitoTracker). Het emissiefilter laat het licht door dat de kleurstof uitzendt en houdt het licht tegen waarmee ze wordt belicht.

1000×: filamenten en mitochondriën

Met het immersieobjectief onderscheidt u de actinefilamenten en de mitochondriën een voor een. Als u het licht aan laat, dooft de fluorescentie geleidelijk uit: dat is fotobleking.

Een cel van dichtbij

De kern, het actineskelet en de mitochondriën, elk met hun eigen kleurstof. Onder de microscoop ziet u ze afzonderlijk, elk met een eigen filter.

3D-weergave: onder de microscoop ziet u haar plat, van bovenaf.

Welke fluorescentiemicroscoop heeft u nodig?

U heeft een excitatielichtbron nodig en een filterset voor elke kleurstof. De microscopen die fluorescentie in hun specificaties vermelden, hebben leds voor uv, blauw en groen met de bijbehorende filters.