Uw microscoop
Licht
Techniek

Onder de microscoop · Bloed

Bloed onder de microscoop: rode en witte bloedcellen en bloedplaatjes

Een uitgestreken en gekleurde druppel op een objectglaasje. Scrol omlaag om hem vergroting voor vergroting te bekijken met een echte microscoop: kies in het paneel het model, het licht en de techniek.

Het beeldveld, de resolutie en de vergrotingen komen uit de technische specificaties van elk apparaat.

40×: kiezen waar u kijkt

Met het objectief van 4× is het beeldveld enkele millimeters groot. Hiermee loopt u het uitstrijkje af en zoekt u de zone waar de cellen niet op elkaar liggen. Elke rode bloedcel is nauwelijks een stipje.

100×: duizenden stipjes

Nu zijn losse stipjes te onderscheiden: elk ervan is een rode bloedcel. Dit is de vergroting om het preparaat af te zoeken, nog niet om de vorm te zien.

400×: schijfjes met een licht midden

De rode bloedcellen zijn nu schijfjes en hun lichtere midden is al te vermoeden. De witte bloedcellen vallen op omdat hun kern paars kleurt. Dit is de gebruikelijke vergroting om cellen te tellen.

1000× met immersieolie

Nu ziet u de vorm: het bleke midden van de rode bloedcel, de lobben van de kern van de neutrofiel en de bloedplaatjes, die veel kleiner zijn.

Probeer in het paneel donkerveld of fasecontrast: wat u ziet verandert volledig.

Waarom het midden lichter lijkt

De rode bloedcel is een schijfje dat aan beide kanten is ingedeukt: ongeveer 2,6 µm dik aan de rand en 0,8 µm in het midden. Door het midden gaat meer licht en daarom ziet het er bleek uit.

Vorm: Evans en Fung (1972). Dit zijaanzicht geeft de microscoop niet, want die ziet maar één vlak.

Welke microscoop heeft u nodig om dit te zien?

Voor bloed heeft u een olie-immersieobjectief van 100× nodig. Bij 400× telt u cellen; bij 1000× bestudeert u hun vorm.

Welke microscoop heb ik nodig?

Veelgestelde vragen

Welke vergroting is nodig om rode bloedcellen te zien?

Bij 100× zijn ze te onderscheiden als stipjes en bij 400× als schijfjes. Om hun vorm en die van de witte bloedcellen te zien, gebruikt u 1000× met een olie-immersieobjectief.

Waarom heeft de rode bloedcel een lichter midden?

Omdat het een schijfje is dat aan beide kanten is ingedeukt: in het midden is het dunner dan aan de rand, en door het midden gaat meer licht.

Wat is immersieolie?

Een olie die tussen het preparaat en het objectief van 100× wordt aangebracht. Ze maakt een numerieke apertuur groter dan 1 mogelijk en daarmee kunt u details van enkele tienden van een micrometer zien.

Kunt u bloed in donkerveld bekijken?

Ja: met een spiegeldonkerveldcondensor (cardioïde) en een olieobjectief van 100× met irisdiafragma lichten de bloedcellen op tegen een zwarte achtergrond. Bij sommige biologische microscopen is dit een standaardconfiguratie.

Hoe deze simulatie is gemaakt

Het is geen foto: het is een berekend model. Vergrotingen, beeldveld en resolutie komen uit de technische specificaties van elke microscoop; de afmetingen van het preparaat uit de bronnen die hieronder worden vermeld.

WatHoe het wordt berekendWat er benaderd is
Vergroting en beeldveldVergroting = oculair × objectief. Beeldveld = gezichtsveldgetal van het oculair ÷ vergroting van het objectief.Exact volgens de specificaties. Sommige specificaties beschrijven de hele serie: de precieze uitrusting met objectieven moet nog per model worden bevestigd.
ResolutieRayleigh-criterium: 0,61 · λ / N.A., met λ = 0,55 µm.Theoretische waarde, met een goed afgestelde condensor.
Nuttige vergrotingTussen 500 en 1000 keer de numerieke apertuur.Daarboven wordt het beeld groter zonder meer detail te tonen.
Vorm van de rode bloedcelVergelijking van Evans en Fung: totale dikte h(ρ) = √(1−ρ²)·(C0 + C2ρ² + C4ρ⁴), met R0 = 3,91 µm, C0 = 0,81 µm, C2 = 7,83 µm en C4 = −4,39 µm. Dat geeft 7,82 µm doorsnede en een maximale dikte van ongeveer 2,6 µm.Variatie in grootte van ±4,5 %, door ons gekozen (het gebruikelijke bereik is 7,5–8,7 µm).
HelderveldHet licht wordt verzwakt naargelang de dikte (Beer-Lambert): daarom komt het midden lichter uit.Kleurtint op het oog gekozen, neigend naar het roze van Giemsa.
FasecontrastHelderheid naargelang het faseverschil: brekingsindex van de rode bloedcel ≈ 1,40 tegenover ≈ 1,35 van het plasma.Halo en intensiteit: kwalitatieve benadering.
DonkerveldDe randen en hellingen lichten op, omdat ze het licht afbuigen. Het is een gangbare techniek om bloed te bekijken: Euromex presenteert zijn iScope met donkerveld als ideaal voor de analyse van levend bloed.Intensiteit bij benadering. De apparaten in de winkel met standaard donkerveld doen dat bij 1000×.
PolarisatieAlleen wat dubbelbrekend is licht op; de objecttafel draait.De rode bloedcel is dat maar heel weinig (ongeveer 3,5 nm vertraging): met een schoolmicroscoop is het niet waar te nemen.
VerhoudingenEén bloedplaatje op elke ~33 rode bloedcellen (5,4 miljoen tegenover ~160.000 per µL). Neutrofiel van 11 µm met 4 lobben.De neutrofiel is bewust dicht bij het midden geplaatst; in normaal bloed is er ongeveer één witte bloedcel op elke 500–1000 rode.

Bronnen

Andere preparaten

Weet u niet welke microscoop u moet kiezen?

Vertel ons wat u wilt bekijken en voor wie, en wij raden u het juiste apparaat aan.

Letscopes-keuzehulpMicroscopen voor scholen